图片丢失啦 2024年生物工程

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    1. 软骨及姜黄联合葛根薏仁提取物对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的改善作用
    丁刘刚, 关婷, 缪金典, 等
    华南理工大学学报(自然科学版)    2024, 52 (4): 17-25.   DOI: 10.12141/j.issn.1000-565X.220815
    摘要356)   HTML1)    PDF(pc) (3373KB)(73)    收藏

    系统研究了姜黄提取物、软骨提取物、葛根薏仁提取物单独及联合使用对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的改善作用,主要从减少膝关节肿胀(炎症)、促进软骨细胞修复和关节基质修复方面,研究了3种提取物在大鼠膝骨关节炎中的协同效应。结果显示:姜黄提取物在抑制关节肿胀、改善软骨损伤方面有较明显的作用,具体表现在能较好地改善Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)、基质金属蛋白酶3(MMP3)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及超氧化物歧化酶(SOD)的水平;软骨提取物主要通过改善MMP3、COMP、TNF-α、前列腺素E2(PGE2)及SOD水平起到明显改善关节炎病变的效果;葛根薏仁提取物能够提高Collagen Ⅱ及SOD水平,抑制MMP3、COMP、TNF-α和白细胞介素1β(IL-1β)的升高,从而改善大鼠膝关节病变程度;3种提取物的复合使用对大鼠膝关节软骨的修复作用最为突出,且对各生化指标的异常改变均有更佳的改善效果。由此可见,通过对姜黄提取物、软骨提取物及葛根薏仁提取物的比例优化,可开发出具有显著抗炎和修复软骨作用的功能性食品,为实现“健康中国2030”添砖加瓦。

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    2. Taq DNA聚合酶的分子改造及其在探针法qPCR直扩体系中的应用
    胡松青, 袁家惠, 刘光毅, 等
    华南理工大学学报(自然科学版)    2024, 52 (4): 8-16.   DOI: 10.12141/j.issn.1000-565X.230090
    摘要267)   HTML3)    PDF(pc) (2393KB)(56)    收藏

    Taq DNA聚合酶作为实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术的核心组分,其性能优劣直接影响qPCR技术的进一步发展。然而,野生型Taq DNA聚合酶的耐抑制剂性能差、延伸性能不足。为获得具有高性能的Taq DNA聚合酶,采用基因工程技术将双链DNA结合蛋白Sso7d或Sto7d融合在野生型Taq DNA聚合酶的N端或C端,构建了4个均可溶表达的改造体,再经过耐受性测试筛选较优的改造体,结果显示:改造体Taq-Sto的耐受性最高,其热稳定性不受影响,且在1 s/kbp的延伸条件下能成功扩增靶标,表明Taq-Sto具有增强的延伸性能,在TaqMan探针法qPCR体系中对腐殖酸、单宁酸、全血等抑制剂同样表现出良好的耐受性。EMSA实验发现:Taq-Sto对DNA模板的结合亲和力有所提高,有利于增强Taq-Sto对模板的竞争力;将Taq-Sto应用于非洲猪瘟病毒(ASFV)的TaqMan探针法qPCR检测,与商品化试剂相比,Taq-Sto具有更低的ASFV检出限,且在体积分数为2%~6%的猪粪便样本或猪肉样本中的检测灵敏度分别为100.0%和85.4%,说明Taq-Sto在直扩qPCR检测领域更具有优势。

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    3. Trigger转座子衍生蛋白1对肝癌细胞生长的影响
    高平, 叶子坚, 钱晓宇, 等
    华南理工大学学报(自然科学版)    2024, 52 (4): 1-7.   DOI: 10.12141/j.issn.1000-565X.230248
    摘要232)   HTML7)    PDF(pc) (2348KB)(102)    收藏

    细胞周期失调是肿瘤重要的标志之一,生物信息学分析结果表明,Trigger转座子衍生蛋白1(TIGD1)在临床肝癌组织中高表达且与细胞周期相关,但相关机制未知。为了探究TIGD1调控肝癌细胞生长的具体机制,首先,利用shRNA质粒构建靶向敲低TIGD1的肝癌细胞系Hep3B,并分析TIGD1敲低对肝癌细胞生长的影响,结果表明细胞生长受阻;接着,通过细胞流式技术分析TIGD1敲低对肝癌细胞周期进程的影响,结果显示,TIGD1敲低的Hep3B细胞系的细胞周期进程主要阻滞于G2/M期;然后,通过免疫沉淀(IP)实验验证TIGD1可能发生相互结合的蛋白分子,结果表明,TIGD1可能与Aurora激酶相互作用蛋白1(AURKAIP1)存在相互结合,进一步的Co-IP实验证实了TIGD1和AURKAIP1之间的相互作用。已知AURKAIP1可调控Aurora激酶A(AURKA)的蛋白酶体降解途径,AURKA是一种有丝分裂调控蛋白,与细胞周期进程密切相关。文中进一步探究TIGD1对AURKA蛋白水平的影响,实验结果表明,在TIGD1敲低的情况下,AURKA在Hep3B细胞系中的蛋白水平明显下调,mRNA水平没有明显变化。综上所述,TIGD1可能通过调控AURKA在肝癌细胞中的转录后水平来影响细胞周期进程,从而影响肝癌的发生发展。

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