华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2003, Vol. 31 ›› Issue (2): 1-4.

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纳豆激酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达

黄立新1 黄志立2 潘力1 杨汝德1 梁世中1   

  1. 1.华南理工大学 食品与生物工程学院 广东广州 510640;2.深圳职业技术学院 生物应用工程系 广东深圳 518055

  • 出版日期:2003-02-20 发布日期:2022-04-07
  • 通信作者: 罗立新(1966-),男,副教授,主要从事基因工程制药、生物化工等方向的研究。
  • 作者简介:罗立新(1966-),男,副教授,主要从事基因工程制药、生物化工等方向的研究。
  • 基金资助:
    广东省自然科学基金资助项目(980540)

Expression of Nattokinase Gene in Yeast  Pichia Pastoris

  • Online:2003-02-20 Published:2022-04-07
  • Contact: 罗立新(1966-),男,副教授,主要从事基因工程制药、生物化工等方向的研究。
  • About author:罗立新(1966-),男,副教授,主要从事基因工程制药、生物化工等方向的研究。

摘要: 构建pPICZαA-NK重组质粒,并转化入E-coli TOP-10中,得到转纳豆激酶基因工程菌,提取重组质粒经单酶切、双酶切、PCR分析及序列测定,证明克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为纳豆激酶基因.将重组质粒pPICZαA-NK线性化后,分别转化毕赤酵母GS115与KM71,在含ZeocinTM的选择性YEPD平板筛选到重组酵母.经检测重组酵母发酵上清液中具纳豆激酶溶纤活性,SDS-PAGE电泳结果表明外源蛋白的表达量占菌体蛋白的10%左右.

关键词: 纳豆激酶基因, 毕赤酵母, 表达

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