非特异性过氧合酶GmaUPO的重组表达及生化表征

doi:10.12141/j.issn.1000-565X.210050

华南理工大学学报（自然科学版） ›› 2021, Vol. 49 ›› Issue (9): 22-28.doi: 10.12141/j.issn.1000-565X.210050

所属专题： 2021年食品科学与技术

非特异性过氧合酶GmaUPO的重组表达及生化表征

蓝东明乜晓爽马云建王永华

华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640

收稿日期:2021-01-29 修回日期:2021-03-09 出版日期:2021-09-25 发布日期:2021-09-01
通信作者: 蓝东明（1980-），男，副研究员，博士生导师，主要从事新型（食品）酶的挖掘、结构功能关系及应用研究。 E-mail:yonghw@scut.edu.cn
作者简介:蓝东明（1980-），男，副研究员，博士生导师，主要从事新型（食品）酶的挖掘、结构功能关系及应用研究。
基金资助:
国家自然科学基金资助项目（31930084，31725022，32001633）

Recombinant Expression and Biochemical Characterization of Unspecific Peroxygenase GmaUPO

LAN Dongming NIE Xiaoshuang MA Yunjian WANG Yonghua

School of Food Science and Engineering，South China University of Technology，Guangzhou 510640，Guangdong，China

Received:2021-01-29 Revised:2021-03-09 Online:2021-09-25 Published:2021-09-01
Contact: 蓝东明（1980-），男，副研究员，博士生导师，主要从事新型（食品）酶的挖掘、结构功能关系及应用研究。 E-mail:yonghw@scut.edu.cn
About author:蓝东明（1980-），男，副研究员，博士生导师，主要从事新型（食品）酶的挖掘、结构功能关系及应用研究。
Supported by:
Supported by the National Natural Science Foundation of China（31930084，31725022，32001633）

摘要/Abstract

摘要： 非特异性过氧合酶（Unspecific Peroxygenase，UPO）因在催化有机底物时具有独特的立体选择性和对映选择性而在工业生产中具有广阔的应用前景。本研究从纹缘盔孢伞（Galerina marginata）的基因组中发现了一个假定的非特异性过氧合酶基因（以下简称GmaUPO），通过全基因合成技术获得了GmaUPO的基因序列，并构建了GmaUPO诱导型表达的毕赤酵母X-33基因工程菌。在最佳的发酵条件下，发酵液酶活力达到6U/L，重组GmaUPO分子质量约为40ku，其最适反应条件为35℃、pH 9.0。重组GmaUPO可在温和条件下利用H2O2高效催化芳环类物质中的惰性C—H键羟化，合成芳环类含氧化合物，在香精香料等领域具有巨大的应用潜力。

关键词: 非特异性过氧合酶, 纹缘盔孢伞, 克隆, 表达, 毕赤酵母

Abstract: Unspecific peroxygenase （UPO） has broad application prospects due to its unique stereoselectivity and enantioselectivity in catalyzing organic substrate.In this study，a putative unspecific peroxygenase gene （GmaUPO） was found from the genome of Galerina marginata，and the corresponding gene sequence was obtained by means of the whole gene synthesis technology.Moreover，Pichia pastoris X-33 gene engineering bacteria of GmaUPO inducible expression was constructed.Under the optimal fermentation condition，the enzyme activity of the fermentation broth can reach 6U/L，the relative molecular mass of GmaUPO is about 40ku，the optimal reaction temperature is 35℃and the optimal pH is 9.0.The recombinant GmaUPO can synthesize aromatic oxygen-containing compounds by using H2O2 to catalyze the hydroxylation of the inert C—H bond in aromatic substances under mild condition，which means that it possesses great application potential in the fields of flavors and fragrances.

Key words: unspecific peroxygenase, Galerina marginata, cloning, expression, Pichia pastoris

中图分类号:

Q786
Q814

蓝东明, 乜晓爽, 马云建, 等. 非特异性过氧合酶GmaUPO的重组表达及生化表征[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2021, 49(9): 22-28.

LAN Dongming NIE Xiaoshuang MA Yunjian WANG Yonghua. Recombinant Expression and Biochemical Characterization of Unspecific Peroxygenase GmaUPO[J]. Journal of South China University of Technology (Natural Science Edition), 2021, 49(9): 22-28.

[1]	谢秋玲, 谭楚敏, 王亚玉, 等. 表达外源蛋白的CHO-DG44细胞株的蛋白质组学研究[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2022, 50(11): 74-81.
[2]	韩双艳李静文王媛媛. 利用SpyTag/SpyCatcher体系提高毕赤酵母重组蛋白生产能力[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2022, 50(1): 143-154.
[3]	全燕鸣何一明. 多机器人任务分配调度的克隆选择算法[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2021, 49(5): 102-110.
[4]	徐军, 李哲帆, 张洋, 等. 平稳随机脉动风场模拟的高维概率空间选点法[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2021, 49(10): 95-103.
[5]	谢秋玲汤杰黄嘉慧卢加刘晨雪璇. 人源化 AGR2 单抗在不同宿主细胞中表达的比较[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2019, 47(6): 142-148.
[6]	周文博刘磊张鹏吕帅. Tabular 表达式中正规函数表操作的形式语义 [J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2019, 47(2): 85-91.
[7]	蒙裕欢, 白云梦, 崔莹, 等. PPI 基因对在癌症中的共表达分析[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2019, 47(11): 78-88.
[8]	黄煜徐青山刘建坤卫鹏. 含分布式电源的改进配电网随机潮流计算[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2017, 45(4): 44-50,58.
[9]	郝宁波廖海斌杨杰. 基于字典学习与稀疏表达分类的低质量字符识别[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2016, 44(5): 123-129.
[10]	韩颖赵寿经杨瑜孙尧王乐. 米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的 RNA 干扰载体的构建[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2016, 44(3): 136-141.
[11]	江学斌林健聪梁世中. 毕赤酵母产木聚糖酶的动力学及流加策略[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2013, 41(12): 115-119,124.
[12]	柯野陈丹李家洲谢明权罗晓春 . 米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(8): 88-94.
[13]	林影周新莹韩双艳张莉叶燕锐郑穗平. 重组毕赤酵母细胞壁蛋白的抽提和分析[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(5): 101-106,120.
[14]	梁达奉黄曾慰曾练强蚁细苗李雨虹余林. α-葡聚糖酶在毕赤酵母中的组成型表达[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(5): 96-100.
[15]	潘力王云艳王斌何攀李俊星. 根癌农杆菌介导脂肪酶在无孢黑曲霉中的高效表达[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(5): 84-89.

非特异性过氧合酶GmaUPO的重组表达及生化表征

Recombinant Expression and Biochemical Characterization of Unspecific Peroxygenase GmaUPO

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价