产辅酶Q10大肠杆菌工程菌的构建

华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 40 ›› Issue (5): 90-95.

产辅酶Q₁₀大肠杆菌工程菌的构建

李家洲¹谢明权¹李安兴²罗晓春^1†

1．华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006; 2．中山大学水生经济动物研究所，广东广州 510275

收稿日期:2011-10-09 修回日期:2012-02-15 出版日期:2012-05-25 发布日期:2012-03-31
通信作者: 罗晓春(1977-) ，男，副教授，主要从事分子生物学研究． E-mail: xcluo@scut．edu．cn E-mail:2003102021@gditc.edu.cn
作者简介:李家洲(1976-) ，男，博士生，副教授，主要从事微生物分子生物学和微生物工程研究．
基金资助:
广东省自然科学基金资助项目( 7004113) ; 广东省工业攻关项目( 2011B010500018)

Construction of Engineering Escherichia coli for Production of Coenzyme Q₁₀

Li Jia-zhou¹Xie Ming-quan¹Li An-xing²Luo Xiao-chun¹

1. School of Biological Science and Engineering,South China University of Technology,Guangzhou 510006,Guangdong,China; 2. Institute of Aquatic Economic Animals,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510275,Guangdong,Ch

Received:2011-10-09 Revised:2012-02-15 Online:2012-05-25 Published:2012-03-31
Contact: 罗晓春(1977-) ，男，副教授，主要从事分子生物学研究． E-mail: xcluo@scut．edu．cn E-mail:2003102021@gditc.edu.cn
About author:李家洲(1976-) ，男，博士生，副教授，主要从事微生物分子生物学和微生物工程研究．
Supported by:
广东省自然科学基金资助项目( 7004113) ; 广东省工业攻关项目( 2011B010500018)

摘要/Abstract

摘要： 克隆放射型根瘤菌ddsA 基因，用于构建red 重组的打靶片段，通过同源重组替换大肠杆菌基因组上的ispB 基因，使合成辅酶Q₈的大肠杆菌具备合成辅酶Q₁₀的能力．通过强化辅酶Q 合成过程中的ddsA、ubiA、ispA、idi 等关键酶基因，可使大肠杆菌辅酶Q₁₀的合成能力提高126. 9%．综合分析表明，ddsA 与ubiA 为辅酶Q₁₀合成的关键基因，ispA 与idi为辅酶Q₁₀合成的次关键基因．

关键词: 辅酶Q, 大肠杆菌, ddsA 基因, 工程菌, 同源重组

Abstract:

In this paper,decaprenyl diphosphate synthase ( ddsA) gene from Rhizobium radiobacter was cloned and used to construct a target fragment for red recombination. Then,the ispB gene in Escherichia coli genome was substituted with ddsA gene by homologic recombination,which made the recombinant Escherichia coli be capable of synthesizing CoQ10 instead of CoQ₈. Moreover,some key enzyme genes for CoQ synthesis,such as ddsA,ubiA,ispA and idi,were strengthened to improve the production of CoQ₁₀( up to 126. 9%) . Comprehensive analyses show that ddsA and ubiA are key genes,while ispA and idi are secondary key genes for CoQ₁₀ synthesis.

Key words: coenzyme Q, Escherichia coli, ddsA gene, engineering bacteria, homologous recombination

中图分类号:

Q789，Q569

李家洲谢明权李安兴罗晓春. 产辅酶Q₁₀大肠杆菌工程菌的构建[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(5): 90-95.

Li Jia-zhou Xie Ming-quan Li An-xing Luo Xiao-chun. Construction of Engineering Escherichia coli for Production of Coenzyme Q₁₀[J]. Journal of South China University of Technology(Natural Science Edition), 2012, 40(5): 90-95.

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产辅酶Q₁₀大肠杆菌工程菌的构建

Construction of Engineering Escherichia coli for Production of Coenzyme Q₁₀

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