华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2025, Vol. 53 ›› Issue (4): 135-146.doi: 10.12141/j.issn.1000-565X.240169
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杨艳歌1 吴占文1,2 刘通1 王帅1,2 魏莹1,2 赵健淞1,2 李红娜1 李涛1 张峰1
1. 中国检验检疫科学研究院,国家市场监管重点实验室(食品质量与安全),北京 100176;
2. 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江 大庆 163000
YANG Yange1 WU Zhanwen1,2 LIU Tong1 WANG Shuai1,2 WEI Ying1,2 ZHAO Jiansong1,2 LI Hongna1 LI Tao1 ZHANG Feng1
1. Key Laboratory of Food Quality and Safety for State Market Regulation, Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100176, China;
2. College of Life Science and Biotechnology, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163000, China
摘要:
肉类食品营养丰富,是微生物生长的温床,即使在低温环境下,大部分微生物也依然具有活性和保留部分毒力,因此仍需对其进行致病菌筛查。本研究基于酶促重组等温扩增技术(ERA),针对肉类食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌三种关键致病菌,首次建立了三重荧光ERA快速检测方法。经过方法优化,本方法可以在12 min内完成对三种致病菌的同时检测,从DNA提取到ERA扩增,整个检测过程仅需半小时即可完成,最低检出限可达10-2 ng/μL。人工模拟污染结果显示,前增菌6 h后,采用本方法可同时检出污染量为1 CFU/mL的三种致病菌。对市售冷藏肉品抽检的结果显示,三种致病菌的检出率在6.45%~19.35%之间,与行业标准SN/T1870—2016实时荧光PCR方法的检测结果一致,证实本方法具有较高的准确性与适用性。本研究将有助于减少食源性致病菌引发的疾病隐患,为未来食源性致病菌现场快速检测奠定了一定的基础。