华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 40 ›› Issue (12): 122-127.

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绿色荧光蛋白标记S2P 在集胞藻6803 中的表达

陈谷 闻盼盼 秦春燕 王玉玲   

  1. 华南理工大学 轻工与食品学院,广东 广州 510640
  • 收稿日期:2012-03-31 修回日期:2012-08-02 出版日期:2012-12-25 发布日期:2012-11-02
  • 通信作者: 陈谷(1973-) ,女,博士,副教授,主要从事分子生物学研究. E-mail:chengu@scut.edu.cn
  • 作者简介:陈谷(1973-) ,女,博士,副教授,主要从事分子生物学研究.
  • 基金资助:

    国家自然科学基金资助项目( 30800609, 31270085) ; 华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目( 2009ZM0006)

Expression of Green Fluorescent Protein-Tagged S2P Homologs in Synechocystis sp. PCC 6803

Chen Gu  Wen Pan-pan  Qin Chun-yan  Wang Yu-ling   

  1. School of Light Industry and Food Sciences,South China University of Technology,Guangzhou 510640,Guangdong,China
  • Received:2012-03-31 Revised:2012-08-02 Online:2012-12-25 Published:2012-11-02
  • Contact: 陈谷(1973-) ,女,博士,副教授,主要从事分子生物学研究. E-mail:chengu@scut.edu.cn
  • About author:陈谷(1973-) ,女,博士,副教授,主要从事分子生物学研究.
  • Supported by:

    国家自然科学基金资助项目( 30800609, 31270085) ; 华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目( 2009ZM0006)

摘要: 为研究集胞藻6803 中两个S2P 同源蛋白酶Slr0643 和Sll0862 的功能,分别在两个蛋白酶的羧基端添加增强型绿色荧光蛋白( EGFP) 标签,构建了两株转基因集胞藻psbA2: : 0643GFP-Cmr /△0643-Kmr和psbA2: : 0862GFP-Cmr /△0862-Kmr .通过逆转录聚合酶链式反应( RT - PCR) 检测到egfp 基因的转录表达,通过激光共聚焦显微镜检测到转基因集胞藻细胞发出的绿色荧光蛋白荧光,表明带EGFP 标签的S2P 融合蛋白在psbA2启动子调控下正确表达.

关键词: 增强型绿色荧光蛋白, S2P 同源蛋白酶, 集胞藻6803, 融合蛋白

Abstract:

In order to explore the functions of site-2 protease ( S2P) homologs Slr0643 and Sll0862 in Synechocystis sp. PCC 6803,enhanced green fluorescent protein ( EGFP) was added to the carboxyl terminal as a protein tag,and two transgenic Synechocystis sp. PCC 6803,namely,psbA2: : 0643GFP-Cmr /△0643-Kmr and psbA2: : 0862GFP-Cmr /△0862-Kmr,were obtained. The transcriptional expression of egfp in two transgenic lines was then detected via RT-PCR,and the GFP fluorescence was observed by using a laser scanning confocal microscope. Both of these confirm the successful expression of S2P fusion proteins tagged with EGFP under the psbA2 promoter.

Key words: enhanced green fluorescent protein, site-2 protease homolog, Synechocystis sp. PCC 6803, fusion protein

中图分类号: