华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2005, Vol. 33 ›› Issue (10): 90-94.

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重组降血压肽多肽序列的设计及表达系统构建

刘冬1 李世敏2 张丽君2 唐语谦1 梁世中1   

  1. 1.华南理工大学 生物科学与工程学院,广东 广州 510640;2.深圳职业技术学院 应用化学与生物技术学院,广东 深圳 518055
  • 收稿日期:2004-12-08 出版日期:2005-10-25 发布日期:2005-10-25
  • 通信作者: 刘冬(1968-),男,博士生,深圳职业技术学院 副教授,主要从事生物技术方面的研究 E-mail:liudongsz@oa.szpt.net
  • 作者简介:刘冬(1968-),男,博士生,深圳职业技术学院 副教授,主要从事生物技术方面的研究
  • 基金资助:

    广东省社会发展攻关资助项目(20032979);深圳市科技计划资助项目(03KJ6021)

Design of Recombined Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitor Peptide Sequence and Construction of Expression System

Liu Dong1  Li Shi-min2  Zhang Li-jun2  Tang Yu-qian1  Liang Shi-zhong1   

  1. 1.College of Biological Science and Engineering,South China Univ.of Tech.,Guangzhou 510640,Guangdong,China;2.School of Applied Chemistry and Biological Technology,Shenzhen Polytechnic,Shenzhen 518055,Guangdong,China
  • Received:2004-12-08 Online:2005-10-25 Published:2005-10-25
  • Contact: 刘冬(1968-),男,博士生,深圳职业技术学院 副教授,主要从事生物技术方面的研究 E-mail:liudongsz@oa.szpt.net
  • About author:刘冬(1968-),男,博士生,深圳职业技术学院 副教授,主要从事生物技术方面的研究
  • Supported by:

    广东省社会发展攻关资助项目(20032979);深圳市科技计划资助项目(03KJ6021)

摘要: 通过分析降血压肽结构与功能的关系,设计并合成5条降血压肽序列.通过活性测定以及体外消化试验,确定P3 (六肽)为理想降血压肽.为实现该小肽在大肠杆菌中的表达,经特定酶切位点将其串联为6拷贝的融合多肽,将相应的基因序列克隆至表达载体pGEX-4T-2并转化至宿主茵Escherichia coli BL21中.双酶切、PCR以及测序结果均表明成功构建了重组质粒pGEX-4T-2-ACEIP.

关键词: 降血压肽, 序列设计, 基因重组

Abstract:

Five angiotensin-converting enzyme inhibitor peptide(ACEIP)sequences were first designed and synthesized according to the relationship between the function and the structure of ACEIP.Next,the optimal peptide,namely,P3(six-amino-acid sequence)was determined by the bioactivity measurement and the digesting test in vitro.It was then jointed at the specific enzyme cleavage site to construct a six-copy fusion peptide.The corresponding coding gene was cloned into pGEX4T-2.The fusion expression vector of pGEX4T-2-ACEIP was finally transformed into Escherichia coli BL21.The results of the double enzyme-cleavage,PCR an d the sequence analysis all indicate that the recombinant plasmid pGEX-T-2-ACEIP is successfully constructed.

Key words: angiotensin-converting enzyme inhibitor peptide, sequence design, gene recombination