人源化 AGR2 单抗在不同宿主细胞中表达的比较

doi:10.12141/j.issn.1000-565X.180454

华南理工大学学报(自然科学版) ›› 2019, Vol. 47 ›› Issue (6): 142-148.doi: 10.12141/j.issn.1000-565X.180454

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人源化 AGR2 单抗在不同宿主细胞中表达的比较

谢秋玲^1,2 汤杰¹ 黄嘉慧³ 卢加² 刘晨雪璇¹

1．暨南大学生命科学技术学院，广东广州 510632; 2．基因工程药物国家工程研究中心，广东广州 510000; 3．韶关学院英东生命科学学院，广东韶关 512005

收稿日期:2018-09-10 修回日期:2018-12-07 出版日期:2019-06-25 发布日期:2019-05-05
通信作者: 谢秋玲(1968-)，女，博士，研究员，主要从事重组抗体表达等研究． E-mail:txql@jnu.edu.cn
作者简介:谢秋玲(1968-)，女，博士，研究员，主要从事重组抗体表达等研究．
基金资助:
广东省重大科技专项(2012A080202014);广东省科技计划项目(2015A020211016)

Comparisons of Humanized AGR2 Monoclonal Antibodies Expressions in Different Host Cells

XIE Qiuling^1,2 TANG Jie¹ HUANG Jiahui³ LU Jia² LIU Chenxuexuan¹

1． College of Life Science and Technology，Jinan University，Guangzhou 510632，Guangdong，China; 2． National Engineering Research Center of Genetic Medicine，Guangzhou 510000，Guangdong，China; 3． College of Yingdong Life Science，Shaoguan University，Shaoguan 512005，Guangdong，China

Received:2018-09-10 Revised:2018-12-07 Online:2019-06-25 Published:2019-05-05
Contact: 谢秋玲(1968-)，女，博士，研究员，主要从事重组抗体表达等研究． E-mail:txql@jnu.edu.cn
About author:谢秋玲(1968-)，女，博士，研究员，主要从事重组抗体表达等研究．
Supported by:
Supported by the Science and Technology Major Project of Guangdong Province(2012A080202014) and Science and Technology Planning Project of Guangdong Province(2015A020211016)

摘要/Abstract

摘要： Anterior gradient-2(AGR2)基因是一种与肿瘤生长、转移、浸润及耐药性密切相关的基因，以 AGR2 为靶点的人源化单克隆抗体 rhAGR2-mAb 有望成为一种新型的抗肿瘤药物．本研究为了进行该抗体的成药性评价，通过瞬时转染的方法分别用 HEK293F 细胞与 CHO 细胞这两种最常用的表达系统表达 rhAGR2-mAb，获得了纯度为 95% 的抗体蛋白，同时比较了不同宿主细胞生产的蛋白在分子量、等电点、糖型等方面的差异，发现在分子量、等电点和糖基化的糖型种类方面，两种宿主细胞表达的 rhAGR2-mAb 并无明显差异，但两者表达的产物在糖型比例上有较大不同，这也导致了两种表达系统所表达的蛋白与抗原 AGR2 的亲和力略有不同，为 rhAGR2-mAb 将来选择合适的蛋白瞬时表达系统和稳定生产系统提供依据．

关键词: 人源化, AGR2 单克隆抗体, 瞬时基因表达, CHO 细胞, HEK 细胞

Abstract: Anterior gradient-2 (AGR2) gene is expressed in many organs of human body，which is closely related to tumor growth，metastasis，invasion and drug resistance． In this study，we successfully developed a humanized monoclonal antibody，rhAGR2-mAb，which can specifically binds with AGR2 to be a new anti-tumor drug． In or- der to evaluate the activity of this antibody，rhAGR2-mAb was expressed with HEK293F cells and CHO cells by transient transfections and this protein with 95% purity was obtained． Then the properties of rhAGR2-mAb inclu- ding molecular weights，isoelectric points，glycan structures expressed in CHO cells and HEK cells were com- pared． The results show that there are no detected differences between HEK293F cells and CHO cells on molecular weights，isoelectric points，glycosylation types． However，the product of two expressions are found different in glycosylation types proportion，which makes them differ in affinities with AGR2． This provides data for selecting a suitable expression system to transiently and stably express rhAGR2-mAb in the future．

Key words: humanization, AGR2 monoclonal antibody, transient expression, CHO cell, HEK cell

中图分类号:

Q819

谢秋玲汤杰黄嘉慧卢加刘晨雪璇. 人源化 AGR2 单抗在不同宿主细胞中表达的比较[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2019, 47(6): 142-148.

XIE Qiuling TANG Jie HUANG Jiahui LU Jia LIU Chenxuexuan . Comparisons of Humanized AGR2 Monoclonal Antibodies Expressions in Different Host Cells[J]. Journal of South China University of Technology(Natural Science Edition), 2019, 47(6): 142-148.

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人源化 AGR2 单抗在不同宿主细胞中表达的比较

Comparisons of Humanized AGR2 Monoclonal Antibodies Expressions in Different Host Cells

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