米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的 RNA 干扰载体的构建

doi:10.3969/j.issn.1000-565X.2016.03.019

华南理工大学学报（自然科学版） ›› 2016, Vol. 44 ›› Issue (3): 136-141.doi: 10.3969/j.issn.1000-565X.2016.03.019

米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的 RNA 干扰载体的构建

韩颖¹赵寿经^1† 杨瑜¹ 孙尧² 王乐¹

1．吉林大学生物与农业工程学院，吉林长春 130022; 2．长春工业大学化学与生命科学学院，吉林长春 130012

收稿日期:2015-04-15 修回日期:2015-06-29 出版日期:2016-03-25 发布日期:2016-02-02
通信作者: 赵寿经(1961-)，男，教授，主要从事农业生物环境与能源工程研究． E-mail:swgc@jlu.edu.cn
作者简介:韩颖(1971-)，女，博士生，副教授，主要从事农业生物环境与能源工程研究． E-mail:jlgshy@163． com
基金资助:
吉林省科技发展计划项目(20130102041JC);吉林省教育厅科学技术研究基金资助项目(吉教科合字［2012］376)

Construction of RNA Interference Expression Vector Containing Key Aging Enzyme Zmlox-2 in Zea Mays

HAN Ying¹ ZHAO Shou-jing¹ YANG Yu¹ SUN Yao² WANG Le¹

1.College of Biological and Agricultural Engineering,Jilin University,Changchun 130022,Jilin,China; 2.College of Chemistry and Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,Jilin,China

Received:2015-04-15 Revised:2015-06-29 Online:2016-03-25 Published:2016-02-02
Contact: 赵寿经(1961-)，男，教授，主要从事农业生物环境与能源工程研究． E-mail:swgc@jlu.edu.cn
About author:韩颖(1971-)，女，博士生，副教授，主要从事农业生物环境与能源工程研究． E-mail:jlgshy@163． com
Supported by:
Supported by the Jilin Scientific and Technological Development Program(20130102041JC)

摘要/Abstract

摘要： 脂肪酸氧化酶(LOX)催化不饱和脂肪酸过氧化反应，导致玉米(Zea mays L． )种子储藏品质的下降．为抑制玉米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的表达，依据 RNA 干扰原理，针对玉米 Zmlox-2 基因进行克隆，采用重组 PCR 及酶切连接技术成功构建了 Zmlox-2 基因的 RNA 干扰植物表达载体，并将重组载体 pRI101-on-Zmlox-2-RNAi 通过热激转化法转化到根癌农杆菌中．实验结果表明 Zmlox-2 基因的 RNA 干扰表达载体构建正确，这为下一步诱导遗传转化、探索陈化酶基因的干扰表达效果奠定了理论和实验基础．

关键词: 生物工程, 陈化, RNA 干扰表达载体, 重组 PCR, 脂肪酸氧化酶

Abstract: The peroxidation of unsaturated fatty acid caused by lipoxygenase (LOX) is known to be responsible for the deterioration of storage quality in maize(Zea mays L.) seed.In order to inhibit the expression of key aging en- zyme Zmlox-2 gene in maize,Zmlox-2 gene in maize seed was cloned according to the principle of RNA interfer- ence (RNAi),and the RNAi plant expression vector containing Zmlox-2 was constructed by means of recombinant PCR and enzyme connection technology.Then,the recombinant vector pRI101-on-Zmlox-2-RNAi was transformed into Agrobacterium tumefaciens via heat shock method.Experimental results show that the RNAi expression vector containing Zmlox-2 gene has been successfully constructed.This research lays a theoretical and experimental foun- dation for the induction of genetic transformation and the exploration of interference expression effect of aging en- zyme gene.

Key words: bioengineering, aging, RNA interference expression vector, recombinant PCR, lipoxygenase

中图分类号:

韩颖赵寿经杨瑜孙尧王乐. 米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的 RNA 干扰载体的构建[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2016, 44(3): 136-141.

HAN Ying ZHAO Shou-jing YANG Yu SUN Yao WANG Le. Construction of RNA Interference Expression Vector Containing Key Aging Enzyme Zmlox-2 in Zea Mays[J]. Journal of South China University of Technology (Natural Science Edition), 2016, 44(3): 136-141.

米陈化关键酶基因 Zmlox-2 的 RNA 干扰载体的构建

Construction of RNA Interference Expression Vector Containing Key Aging Enzyme Zmlox-2 in Zea Mays

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