抗克伦特罗噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定

华南理工大学学报（自然科学版） ›› 2005, Vol. 33 ›› Issue (11): 51-54.

抗克伦特罗噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定

潘科¹ 王弘¹ 张宏斌² 王捷² 雷红涛¹ 杨金易¹ 孙远明¹

1．华南农业大学食品质量安全广东省教育厅重点实验室，广东广州 510640；2．广州军区广州总医院医学实验中心，广东广州 510010

收稿日期:2005-09-21 出版日期:2005-11-25 发布日期:2005-11-25
通信作者: 王弘，E-mail：gzwhongd@163．com
作者简介:潘科(1977-)，男，博士生，主要从事食品安全快速检测研究
基金资助:
国家自然科学基金资助项目(30400354，20477012)；广东省自然科学基金资助项目(04300502)

Construction，Screening and Identification of Phage scFv Library Against Clenbuterol

Pan Ke¹ Wang Hong¹ Zhang Hong-bin² Wang Jie² Lei Hong-tao¹ Yang Jin-yi¹ Sun Yuan-ruin¹

1.The Key Laboratory of Food Quality and Safety,Dept.of Education of Guangdong Province,South China Agricultural Univ Guangzhou 510642,Guangdong,China;2.Center of Medical Research,General Hospital of Guangzhou Military Command,Guangzhou 510010,Guangdong,China

Received:2005-09-21 Online:2005-11-25 Published:2005-11-25
Contact: 王弘，E-mail：gzwhongd@163．com
About author:潘科(1977-)，男，博士生，主要从事食品安全快速检测研究
Supported by:
国家自然科学基金资助项目(30400354，20477012)；广东省自然科学基金资助项目(04300502)

摘要/Abstract

摘要： 利用噬茵体展示技术构建克伦特罗(CBL)单链抗体(scFv)库，从中筛选CBL特异性噬茵体scFv，从而成功扩增出抗CBL的V_L，V_H 基因片段并采用重叠延伸PCR拼接为全长的scFv基因片段，抗体库库容约为1．6×10 ，经4轮吸附—洗脱—扩增的富集，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法筛选到6个具有CBL结合活性的噬茵体scFv，为进一步大量表达CBL单链抗体奠定了基础．

关键词: 克伦特罗, 单链抗体, 噬茵体展示

Abstract:

Phage single·chain Fv(scFv)libraries with a size of about 1.6×1 0 were constructed for clenbuterol (CBL)by the phage display technology,and then,specific anti.CBL scFv was screened.Thus,the variable heavy (VH)and light(VL)anti·CBL genes were successfully amplified and scFv gene was assembled by overlapping PCR.After 4 times of enriched procedure in the order of adsorption- elution- amplification , 6 CBL-positive phage scFv clones were screened by ELISA.This research lays a foundation for the further expression of anti CBL scFv.

Key words: clenbuterol, single-chain Fv, phage display

潘科王弘张宏斌王捷雷红涛杨金易孙远明. 抗克伦特罗噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定[J]. 华南理工大学学报（自然科学版）, 2005, 33(11): 51-54.

Pan Ke Wang Hong Zhang Hong-bin Wang Jie Lei Hong-tao Yang Jin-yi Sun Yuan-ruin. Construction，Screening and Identification of Phage scFv Library Against Clenbuterol[J]. Journal of South China University of Technology (Natural Science Edition), 2005, 33(11): 51-54.

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